生体試料中のフタル酸エステル類の分析法 【試験法の概要】
生体試料からアセトニトリルによりフタル酸エステル類(PAE)注1、注2を抽出し、抽出液をフロリジル・PSA
カラムクロマトグラフィーによって精製し、ガスクロマトグラフ/質量分析計(GC/MS)で定性、定量を行う。
分析の対象となるPAE は、フタル酸ジブチル(DBP)、フタル酸ブチルベンジル(BBP)、フタル酸ジ-2-エチルヘキシル(DEHP)、フタル酸ジイソオクチル(DiOP)、フタル酸ジイソノニル(DiNP)である。
なお、本法は血清に適用できる。
【試薬】
すべての試薬類は、クロマトグラム上でPAE の分析に支障のないことを確認した後用いる。
@ 有機溶媒:n-ヘキサン、アセトニトリル、アセトンはフタル酸エステル試験用を用い、使用直前に開封する注3。
A 無水硫酸ナトリウム:残留農薬試験用を200℃で2 時間加熱し、放冷後使用する。
B 塩化ナトリウム:フタル酸エステル試験用を200℃で2 時間加熱し、放冷後使用する。
C 精製水:フタル酸エステル試験用のn-ヘキサンで洗浄した蒸留水を用いる注4。
D フロリジル:フロリジールPR を200℃で2 時間加熱し、放冷後使用する。
E PSA:ボンデシルPSA を用いる。
F PAE 標準溶液:各標準品20 mg を20 mL のメスフラスコに量り取り、n-ヘキサンにて20 mL
とし、1000μg/mL 溶液を調製する。適宜希釈し、PAE 標準溶液とする。
G 内部標準溶液:各フタル酸エステル-d4 標準品20 mg を20 mL のメスフラスコに量り取り、n-ヘキサンにて20 mL
とし、1000μg/mL 溶液を調製する。適宜希釈し、内部標準溶液とする。
【装置】
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ガスクロマトグラフ/質量分析計(GC/MS):電子イオン化(EI)イオン源及びキャピラリーカラム(スプリットレス)を装着し、選択イオン検出法(SIM)による分析が可能な装置を用いる。
A フロリジル・PSA カラム:ガラス製クロマトカラム(内径15 mm、長さ110 mm)に、フロリジル1
g、その上にPSA0.5 g、無水硫酸ナトリウム2 g を充填する。使用前にアセトン10 mL 及びn-ヘキサン10 mL
を用いて洗浄する。 |