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薬毒物検査法 >グルホシネート 同定・定量法
HPLC
試料: 尿、血液 試料量: 0.1ml 所要時間: 50分
操作手順
  1. 血液(尿)0.1mlに0.1Mホウ酸緩衝液 (pH8.5) 0.4ml、アセトン1mlを加え、撹拌する。
  2. 3,000rpmで5分間、遠心分離する。
  3. 上清50μlに0.1Mホウ酸緩衝液 (pH8.5) 0.2ml、FMOC-Cl (0.1%,アセトン) 0.2mlを加える。
  4. 40℃で10分間、加温する。
  5. 酢酸エチル2mlを加えて撹拌する。
  6. 水層10μlをHPLCに注入する。
    分析条件例
    装置 蛍光検出器付HPLC
    カラム Inertsil ODS-2(4.6mm ID, 150mm,粒子経 5μm,ジーエルサイエンス)
    流速 1.0 ml/min
    移動相 アセトニトリル/リン酸(10mM,pH2.5)[3:7(0-7min)-1:1(7-13min)-8:2(13-15), v/v]
    検出波長 265nm(励起),315nm(蛍光)
    概要
    high performance liquid chromatographの略で移動相にメタノールやアセトニトリルなどの液体を用いて混合成分を分離する装置である。装置構成としては、GCと同じように、試料導入部(注入口)、分離カラム、検出器で構成されている。導入された試料は、液体のまま分離カラムへと移動する。分離カラムで分離された成分は、検出器へと移動する。分析対象成分は、医薬品などの難揮発性化合物、不揮発性化合物や熱に不安定な化合物である。検出器としては、紫外可視検出器が汎用されているが、最近は多波長紫外可視検出器(photodiodearray detector)が使用されている。また、近年は、質量分析計を接続した装置も普及している。質量分析計(mass spectrometry; MS)からは分子量や構造情報が得られ、化合物の同定に有用である。
    その他の分析方法
    適用試料外 (分析法データベース)
    参考文献
    1. 阿久澤尚士、赤岩英夫:分析化学, 46, 69-74, 1997.
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