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薬毒物検査法 >バルビツール酸 同定・定量法
HPLC
試料: 水、尿、血液 試料量: 0.5ml 所要時間: 50分
操作手順
  1. 試験管に血液(尿)0.5ml、内部標準溶液(5-(4-メチルフェニル)-5-フェニルヒダントイン, 10mg/ml)50ml、酢酸ナトリウム緩衝液(pH6.0)0.1mlおよび酢酸エチル/エーテル(1:1, v/v)3mlを加える。
  2. 2分間、撹拌する。
  3. 800×gで 5 分間遠心分離した後、有機層を新しい試験管に移す。
  4. 窒素気流下で溶剤を留去する。
  5. 残渣を移動相 0.1ml に溶解する。
    分析条件例
    装置 HPLC
    カラム オクタデシル基結合シリカ(ODS)カラム (4.6mm ID, 1000mm, 粒子経 2μm)
    カラム温度 室温
    カラム説明 汎用タイプのODSカラムでも良いが、残存シラノール基の影響を受けるためエンドキャッピングしたカラムの使用が推奨される
    流速 0.4ml/min
    移動相 アセトニトリル/リン酸(2.8mM)[7:3, v/v]
    検出波長 215nm
    概要
    high performance liquid chromatographの略で移動相にメタノールやアセトニトリルなどの液体を用いて混合成分を分離する装置である。装置構成としては、GCと同じように、試料導入部(注入口)、分離カラム、検出器で構成されている。導入された試料は、液体のまま分離カラムへと移動する。分離カラムで分離された成分は、検出器へと移動する。分析対象成分は、医薬品などの難揮発性化合物、不揮発性化合物や熱に不安定な化合物である。検出器としては、紫外可視検出器が汎用されているが、最近は多波長紫外可視検出器(photodiodearray detector)が使用されている。また、近年は、質量分析計を接続した装置も普及している。質量分析計(mass spectrometry; MS)からは分子量や構造情報が得られ、化合物の同定に有用である。
    その他の分析方法
    適用試料:血液
    適用試料外 (分析法データベース)
    参考文献
    1. E. Tanaka, et al:Foren. Sci. Int., 85, 73-82, 1997.
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